工蚁的主要职责是建造和扩大保卫巢穴、采集食物、伺喂幼蚁及蚁后等。某些澳大利亚蚂蚁将它们的工蚁作为一种活的储藏罐。当工蚁采集了大量的花蜜，即一种源自花中的甜甜的液体，将它吞进体内、身体变得膨大起来之后，它们就将自身挂在巢穴的天花板上，一直到有别的蚂蚁需要食用它们体内储藏的那些花蜜为止。
工蚁又称职蚁，无翅，一般为群体中最小的个体，但数量最多。复眼小，单眼极微小或无。上颚、触角和三对胸足都很发达，善于步行奔走。工蚁是没有生殖能力的雌性。工蚁的主要职责是建造和扩大保卫巢穴、采集食物、伺喂幼蚁及蚁后等。
工蚁是没有完全发育彻底的雌性个体，发育受阻主要受蚁后释放的化学信息控制。当工蚁脱离了蚁后化学信息控制以后，发育快的个体会领先性成熟，因此会导致产卵现象出现(如果不是孤雌生殖型的种类，不会孵化出幼蚁)。
