1、染毒：CP（环磷酰胺）腹腔注射（100mg/kg）一次
2、细胞周期同步化：处死前2-3小时腹腔注射秋水仙碱400mg/L，4mg/kg
3、取样：双侧股骨→PBS（pH6.8）5ml冲洗骨髓腔→离心1500rpm/min离心十分钟→弃上清
4、低渗：0.075M KCl6ml,37°c孵育15分钟→加入固定液1ml预固定1分钟→离心1000rpm/min十分钟，弃上清
5、固定：固定液4ml，37°c孵育20分钟→离心十分钟（1000rpm/min），弃上清。重复一次步骤5.
6、制片：试管内余下约0.5ml，冰冻玻片滴片，干燥。
7、染色：使用Giemsa染液染色3分钟。
8、阅片：油镜下计数100个中期相细胞，畸变细胞率
