流式细胞仪：检测细胞周期实验指南

1、收集6孔板中的培养液于离心管中，1000rpm/min,离心10分钟，真空泵抽走上清液。

3、逐滴加入5ml或更多预冷的70-80%的乙醇，涡旋以混匀细胞， 4°C避光过夜（>18小时）。若长期保存，将固定的细胞放于-20°C.

5、 细胞染色：每管样本需10^6细胞。具体操作如下：A. 对于PI/RNase 染色，将细胞重悬于0.5 mL PI/RNase 染色液。B 对于7-AAD染色，将峙僮侯劝细胞重悬于0.1 mL 染色液，同时加入20 μL7-AAD染色液。

7、分析前4°C避光保存样本，1小时之内上流式细胞仪检测。