大鼠神经干细胞的培养方法的具体步骤

 时间:2024-10-25 21:47:26

1、 实验前准备的试验器具和试剂:高压灭菌细胞培养要用到的器皿:玻璃试管、离心管、玻璃吸管、瓶子、枪头等和各种手术器械。新鲜配置75%酒精。实验前半小时将高压灭菌的所有器械盒放入超净工作台内,紫外线照射至少半小时。如所示,准备这些器具准备在超净工作台上进行紫外消毒。

大鼠神经干细胞的培养方法的具体步骤

3、制备神经细胞悬液,剪碎海马为1mm3大小的组织块,用0.25%胰酶(或Accutase)37℃消化2min,终止反应1000r/min离心3min, 弃去胰酶。加入种植液(neuralbasal +2%B27+0.5% L-glutamine),吹打形成细胞悬液。将细胞悬液加入培养皿中( 3ml/皿/30mm)。

大鼠神经干细胞的培养方法的具体步骤

5、培养24小时后再在显微镜下观察,如下图所示:

大鼠神经干细胞的培养方法的具体步骤

7、培养第7天的,在显微镜下观察,如下图所示:

大鼠神经干细胞的培养方法的具体步骤
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